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更新时间:2017-03-21
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大肠杆菌大肠菌群测试片(ECC)使用说明
方法编号:5021
1 原理及适用范围:大肠杆菌( Escherichia coli )和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群测试片(E.coli / Coliform Count Plate)是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。
2 操作方法
2.1 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,振摇后成为1:100的稀释液。
2.2 接种:一般食品选1~2个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌大肠菌群测试片(BE203)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,zui后用手轻轻地压一下,每个稀释度接种两片。
2.3 培养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为
3 结果判读: 培养后大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。选择有阳性菌落的zui高稀释度的测试片进行计数,然后乘以稀释倍数即为样品中每毫升(克)含有大肠菌群数。
4 附加说明
4.1我国的食品卫生标准大多都以大肠菌群( Coliform )作为检测指标,而欧盟等许多国家则以大肠杆菌(E.coli)作为检测对象,因此,本产品对于出口食品和航空配餐等企业具有更广泛的应用前景。
4.2 如果样品的酸碱度pH 7.0以下时,应先用灭过菌的碱性溶液(如1mol/LNaOH)调节到pH7.0-~8.0。
4.3大肠杆菌大肠菌群测试片对纯菌的检测灵敏度可达0.15 cfu/mL。
4.4一般食品对于大肠菌群的要求都比较严格,如果测试片上有成片的红点,或者中央没有红点,但边缘有很多红点,一定是已经严重超标,建议按多不可计来报告。